Benang operasi terbuat dari berbagai macam bahan, baik alami maupun sintetis. Bahan alami yang umum digunakan adalah kolagen yang berasal dari usus hewan (seperti domba atau sapi) atau jaringan ikat hewan lainnya. Bahan sintetis yang umum digunakan meliputi nilon, polypropylene, polyester, dan berbagai jenis polimer lainnya.